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Message par Admin le Ven 8 Mai - 22:32

Twisted Evil

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Re: Cours 2

Message par laurence le Lun 11 Mai - 11:00

c quoi la différence entre la phase solide et liquide?? pcq pr la phase solide, g bien compris k ct du verre, polystyrène, nylon, cellulose ou autre.. mais pq ds le cours 2 dia 13 (ou p 7) elle met que pr le méthode par compétition, c souvent sur un phase liquide: soit ds un tube en polystyrène ou du verre ou sur des plaques non absorbantes???
et elle parle de quoi qd elle dit sur du plastique???
merci
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laurence

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Message par JF le Lun 11 Mai - 17:46

ben disons qu'en phase liquide, les parois du tube ne sont pas impliquées dans la réaction et il n'y a pas de particules recouvertes d'Ac, cela se passe en solution (dixit le cours).

Mais ton tube peut être en verre ou en polystyrène.

Tandis qu'en phase solide, t'as tes Ac ou Ag qui sont fixé au polystyrène ou sur le verre.

Je ne sais pas si ça répond complètement à ta question... ?
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Message par JF le Lun 11 Mai - 21:01

Question bête : est-ce que les immunométriques c'est toujours sandwich ?

donc ça marche pas pour les haptènes qui n'ont qu'un épitope alors ?

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En fait, en immunométrie on est obligé de faire un lavage non ? car sinon, on élimine pas le complexe Ag-Ac(2aire)
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Message par laurence le Lun 11 Mai - 22:33

un dosage immunométrique = méthode sandwich...et effectivement la seule méthode de dosage pour les haptènes av un seul epitope = méthode par compétition (cours 1 p22 ou dia 44)...
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Message par JF le Lun 11 Mai - 23:17

pour les séparations en phase liquide, ce n'est que pour les "compétitions" ?
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Message par laurence le Lun 11 Mai - 23:55

pour les compétitions c presque tjs en phase liquide mais pfs possible k ca se passe sur phase solide... ds son cours qd elle parle de phase liquide elle fait reference a la methode par compétition...
je pense k les phases liquides ce n'est que pr la methode compétitive...
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Message par JF le Mar 12 Mai - 0:28

c'est ce que j'ai cru comprendre aussi... mais c'est pas très clair, et on a pas vraiment le temps de se renseigner fâché
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Message par laurence le Mar 12 Mai - 10:41

pq on doit effectuer des lavages avec un tampon contenant du BSA pour prevenir les laisions non spécifiques??? dia 48 ou p24...
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Message par JF le Mar 12 Mai - 13:27

en fait, sur ton support solide, il pourrait y avoir des liaisons non-spécifiques avec l'Ag ou autre chose.

C'est comme avec un western blot, il faut saturer les sites de lisaison avec des protéines non spécifiques (albumine etc...), comme ça tu "tapisse" les endroits non recouverts par les anticorps fixés sur le support, et l'Ag qui va arriver ne pourra pas s'y fixer. Il ne pourra que se fixer éventuellement à son anticorps correspondant.
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